آزمون طیف سنجی (جذب UV-Vis) چیست؟
آزمون طیف‌سنجی جذب UV-Vis (ماوراء بنفش-مرئی) به روش اسپکتروفوتومتر یک تکنیک تحلیلی است که برای اندازه‌گیری جذب تابش الکترومغناطیسی در نواحی ماوراء بنفش و مرئی طیف نور به وسیله نمونه‌ها استفاده می‌شود.
در این روش، نور با طول‌موج‌های مختلف از نمونه عبور داده می‌شود و میزان جذب نور در هر طول‌موج ثبت می‌شود. این اندازه‌گیری‌ها اطلاعاتی در مورد ویژگی‌های الکترونیکی مولکول‌ها و پیوندهای شیمیایی در نمونه فراهم می‌آورد. این روش عمدتاً در شیمی تحلیلی، بیوشیمی و کنترل کیفیت برای تعیین غلظت مواد شیمیایی مختلف و بررسی خواص مولکولی استفاده می‌شود.
جهت دریافت خدمات و مشاوره رایگان با نیکوفامد تماس بگیرید.
روش انجام آزمون طیف سنجی (جذب UV-Vis) به روش اسپکتروفوتومتر
آماده‌سازی نمونه
ابتدا نمونه‌ای که قرار است مورد تحلیل قرار گیرد، باید به شکلی مناسب برای اندازه‌گیری آماده شود. این نمونه می‌تواند یک محلول شیمیایی باشد که در یک حلال حل شده است.
در صورتی که نمونه جامد باشد، معمولاً باید آن را در حلال حل کرده و یا به صورت محلول درآورد.
انتخاب حلال مناسب
برای حل کردن نمونه، باید از حلالی استفاده کرد که خود در ناحیه UV-Vis (ماوراء بنفش و مرئی) جذب نداشته باشد، تا اختلالی در اندازه‌گیری ایجاد نشود. حلال‌های معمول شامل آب، اتانول یا متانول هستند.
تنظیم اسپکتروفوتومتر
اسپکتروفوتومتر باید طبق دستورالعمل‌های تولیدکننده تنظیم شود. این شامل روشن کردن دستگاه و تنظیم طول‌موج اولیه است. دستگاه معمولاً قادر به پوشش طیف UV و مرئی با طول‌موج‌های مختلف است.
کالیبراسیون دستگاه
برای دقت بیشتر، اسپکتروفوتومتر باید با استفاده از یک نمونه استاندارد یا یک حلال خالی کالیبره شود. این فرآیند به تنظیم دستگاه و کاهش خطاهای احتمالی کمک می‌کند.
برای این کار، یک سل نمونه خالی (حاوی فقط حلال) در محل مخصوص دستگاه قرار داده می‌شود و دستگاه به صفر تنظیم می‌شود (این عمل به نام «تنظیم صفر» یا «تظریف پایه» شناخته می‌شود).
جهت کسب اطلاعات بیشتر در رابطه با آزمون های فیزیک و شیمیایی کلیک کنید.
قرار دادن نمونه در دستگاه
محلول نمونه باید در یک سل مخصوص قرار گیرد. این سل‌ها معمولاً از جنس شیشه یا کوارتز هستند که در نواحی UV و مرئی شفاف هستند.
سل نمونه باید در مسیر تابش نور اسپکتروفوتومتر قرار گیرد.
تنظیم طول‌موج
طول‌موج‌های مختلف نور از 200 تا 800 نانومتر معمولاً برای آزمایش انتخاب می‌شوند. بسته به ویژگی‌های نمونه، دستگاه باید به طور خودکار یا دستی روی طول‌موج‌های مختلف تنظیم شود.
در طی آزمایش، دستگاه میزان نور عبوری از نمونه را در هر طول‌موج می‌سنجد.
اندازه‌گیری جذب
اسپکتروفوتومتر به طور پیوسته نور تابشی را از منبع به نمونه می‌تاباند و میزان جذب نور را در هر طول‌موج می‌سنجد. این مقدار به صورت درصد جذب یا جذب نهایی (Absorbance) نشان داده می‌شود.
نمودار جذب در برابر طول‌موج برای نمونه رسم می‌شود که به طیف جذب معروف است.
تجزیه و تحلیل داده‌ها
پس از دریافت طیف جذب، می‌توان اطلاعاتی مانند محل و شدت قله‌ها یا افت‌های جذب را استخراج کرد.
با مقایسه این داده‌ها با استانداردها یا داده‌های مرجع، می‌توان اطلاعاتی از قبیل نوع ماده، غلظت آن یا ویژگی‌های ساختاری مولکول‌ها به دست آورد.
مقایسه با استانداردها
برای تعیین غلظت یا شناسایی ترکیبات خاص، طیف جذب نمونه باید با طیف‌های استاندارد یا طیف‌های مرجع مقایسه شود.
در صورتی که غلظت نمونه مشخص باشد، می‌توان از قانون لامبرت-بئربر برای محاسبه غلظت استفاده کرد.
تمیز کردن دستگاه
پس از اتمام آزمون، سل‌های نمونه و دستگاه باید تمیز شوند تا از آلودگی یا اختلالات در آزمایشات بعدی جلوگیری شود.
دستگاه باید با یک پارچه تمیز و محلول مناسب پاک‌سازی شود.
با دنبال کردن این مراحل، می‌توان طیف‌سنجی UV-Vis را با دقت انجام داد و از نتایج آن برای تجزیه و تحلیل ترکیبات شیمیایی مختلف استفاده کرد.
جهت آشنایی با آزمون اندازه گیری ویتامین ها کلیک کنید.
آزمایشگاه همکارنیکوفارمد با استفاده از دستگاه‌های پیشرفته اسپکتروفوتومتر، آزمون طیف‌سنجی جذب UV-Vis را برای تحلیل و شناسایی مواد شیمیایی و بیولوژیکی انجام می‌دهد. این آزمایشگاه قادر است با استفاده از تکنیک‌های دقیق و معتبر، طیف جذب نمونه‌ها را در نواحی ماوراء بنفش و مرئی اندازه‌گیری کرده و داده‌های ارزشمندی برای تعیین غلظت ترکیبات، بررسی ویژگی‌های ساختاری مولکول‌ها و شناسایی مواد مختلف فراهم آورد. آزمایشگاه همکارنیکوفارمد با بهره‌گیری از تیم متخصص و تجهیزات مدرن، خدمات آزمایشگاهی با کیفیت بالا را ارائه می‌دهد.